EphA2基因敲除和过表达BHK-21细胞系的构建及其对口蹄疫病毒复制的影响
文献类型: 中文期刊
作者: 李熙忠;范许许;朱兆宇;裴丹诗;王一卓;何路;任青峰;郑海学;李伟伟;郜原
作者机构:
关键词: CRISPR/Cas9;EphA2;口蹄疫病毒
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 构建促红细胞生成素肝细胞受体A2(Erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2,EphA2)基因敲除和过表达的BHK-21细胞系,探究其对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建EphA2基因敲除的BHK-21细胞系,利用慢病毒感染构建EphA2基因过表达的BHK-21细胞系。经嘌呤霉素筛选及单克隆挑取,成功获得稳定细胞系。随后,以野生型BHK-21细胞为对照,将FMDV分别感染上述细胞系,采用实时荧光定量 PCR、蛋白质免疫印迹等方法检测病毒核酸和蛋白水平。结果表明,EphA2基因敲除后,FMDV在BHK-21细胞中的复制显著受到抑制,病毒核酸和蛋白表达量明显降低;而EphA2基因过表达时,FMDV复制增强。本研究揭示了EphA2基因在FMDV复制过程中具有重要作用,为深入理解FMDV的感染机制及防控策略提供了理论依据。
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