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传染性支气管炎病毒S1蛋白中和表位-Fc融合蛋白的表达及免疫原性鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 郭森;李慧昕;韩宗玺;孙军峰;夏长友

作者机构：

关键词： 禽传染性支气管炎病毒;S1亚基;中和表位;IgY Fc片段;免疫原性

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为构建禽传染性支气管炎病毒（IBV）S1蛋白的免疫原，本研究通过比对已公布的S1中和表位和当前我国流行的GI-19型代表毒株ck/CH/LDL/091022（LDL091022）S1蛋白氨基酸序列，鉴定第22-100和410-492位氨基酸区域为中和表位优势区，分别命名为B1和B2。构建表达LDL091022 B1和B2的质粒以及在C端融合鸡IgY Fc片段的质粒，通过Western blot和IFA检测发现融合IgY Fc片段后能够显著提高蛋白的表达量。转染Expi 293F细胞表达并纯化获得了融合IgY Fc片段的重组蛋白B1-Fc和B2-Fc。通过Western blot和ELISA鉴定B1-Fc和B2-Fc与LDL091022血清的反应性，结果发现B2-Fc与血清的反应性明显优于B1-Fc。将质粒pCAGGS-B2-Fc和重组蛋白B2-Fc免疫SPF鸡，通过ELISA和IFA检测血清中的抗体水平，结果显示B2-Fc加强免疫后能够有效诱导针对B2表位的抗体，且IFA结果显示血清能与LDL091022-S1蛋白和B2-Fc发生特异性反应。进一步利用中和试验检测血清中和效价为16。上述结果表明，本研究制备的IBV S1蛋白中和表位-Fc融合蛋白具有良好的表达水平和免疫原性，能够诱导机体产生一定水平的中和抗体，为进一步研发新型IBV亚单位疫苗提供了借鉴。

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