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激活标志物CD69蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 徐娜;张芷盈;杜星南;于黛辉;郑海学;陈霞;伍国强

作者机构：

关键词： CD69基因;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为了评估原核表达的猪源CD69蛋白的免疫原性及其潜在的应用价值，以pET-32a(+)为原核表达载体，猪源CD69基因为目的基因，构建重组质粒pET-32a-CD69，针对大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达；通过变性、复性等方法成功纯化蛋白后，将纯化的CD69蛋白与佐剂按1∶1的比例混合，多次免疫雄性BALB/c小鼠制备多克隆抗体，并用免疫印迹试验(Western-blot)与酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)进行鉴定。结果表明，重组的CD69以包涵体形式表达，分子质量约为35 kDa；通过ELISA测定鼠源多克隆抗体效价，结果显示效价达到1∶64 000以上；Western-blot结果表明，该多克隆抗体表现出良好的反应性和特异性。激活标志物CD69蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备，为今后我国猪产业的发展与猪相关疾病检测提供了帮助。

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