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CRISPR-Cas9介导的TRIM3基因敲除细胞系的建立及其应用

文献类型： 中文期刊

作者： 裴丹诗;范许许;朱兆宇;王一卓;何路;任青峰;李熙忠;郑海学;李伟伟;万博

作者机构：

关键词： TRIM3;口蹄疫病毒;细胞系

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 本研究旨在探究宿主蛋白TRIM3对口蹄疫病毒（FMDV）复制的影响。利用CRISPR/Cas9系统构建了TRIM3基因敲除的BHK21细胞系，并借助CCK8试剂盒检测了该基因的缺失对细胞活力的影响，结果表明，TRIM3敲除对细胞生长状态无明显影响。将FMDV分别感染野生型和TRIM3敲除型的BHK21细胞，通过Q-PCR、Western-blot和TCID50等多种方法检测FMDV在上述2株细胞中的复制情况，结果表明，TRIM3缺失能够显著抑制FMDV的复制。为了进一步验证TRIM3的表型功能，用慢病毒包装系统构建了TRIM3过表达细胞系。结果显示，过量表达TRIM3能够促进FMDV的复制。综上所述，本研究通过CRISPR/Cas9系统成功构建了TRIM3基因敲除细胞系和过表达细胞系，首次证明了TRIM3能够正向调控FMDV的复制，为后续探究TRIM3调控FMDV复制的具体机制奠定了基础。

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