数字农科院2.0

非洲猪瘟病毒DP148R蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王永琦;郑君;翁长江

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;DP148R蛋白;原核表达;单克隆抗体

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2022 年 44 卷 3 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)DP148R蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究构建了重组原核表达质粒pET-28a-DP148R,通过PCR和测序鉴定正确后经原核表达并纯化了重组DP148R蛋白,将其按常规方法免疫BALB/c小鼠,取小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过ELISA方法筛选,获得一株能稳定分泌DP148R蛋白MAb的杂交瘤细胞株7D6。采用间接ELISA方法检测了该MAb的抗体效价,利用DP148R截短表达的各重组蛋白为抗原,采用western blot方法鉴定了该MAb识别的抗原表位,通过western blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定了该MAb的反应原性。鉴定结果显示,纯化的MAb效价高于1:105,MAb 7D6为IgG2b亚型,该MAb识别的线性抗原表位为29LYWVFRAIHI38；分别采用western blot和IFA两种方法鉴定,结果均显示,纯化的MAb既能够特异性识别HEK293T细胞中表达的Flag-DP148R蛋白,也能够识别ASFV感染的PAMs细胞中表达的DP148R蛋白,反应原性较强。本研究制备的ASFV DP148R蛋白MAb可以为ASF诊断方法的建立以及DP148R蛋白的生物学功能研究提供参考依据。

分类号：

  • 相关文献

[1]非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备. 张萌,刘英楠,谢振华,敖清莹,吕璐,于婉琪,金文杰,秦爱建,扈荣良,陈鸿军. 2021

[2]非洲猪瘟病毒K205R蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 赵亚茹, 韩蓉, 杨吉飞, 牛庆丽, 关贵全, 罗建勋, 刘光远, 殷宏, GRZEGORZ Wozniakowski, 刘志杰. 2019

[3]非洲猪瘟病毒pI215L蛋白单克隆抗体的制备及其反应性研究. 许文杰,薛梦迪,张元峰,李长尧,黄丽,熊涛,翁长江. 2021

[4]非洲猪瘟病毒p30单克隆抗体的制备和鉴定. 杨莎莎,苗雨润,薄宗义,王振忠,谭凯,鲍晨沂,吴晓东,陈鸿军,郑龙三,钱莺娟,戴建君. 2020

[5]非洲猪瘟病毒E301R蛋白单克隆抗体的制备及其初步应用. 刘学敏,张元峰,王永琦,康力,黄丽,翁长江. 2022

[6]非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA抗体检测方法的建立. 周改静,罗俊聪,石正旺,万颖,杨波,曹丽艳,宋锐,田宏,郑海学. 2022

[7]非洲猪瘟病毒pE301R蛋白单克隆抗体的制备与表位鉴定. 刘学敏,张元峰,王永琦,康力,黄丽,翁长江. 2022

[8]非洲猪瘟病毒CD2v蛋白阻断ELISA候选单克隆抗体的筛选及免疫学特性鉴定. 王彩霞,史喜菊,冯春燕,于浩洋,仇松寅,刘晓飞,陈冬杰,贾红,吴绍强,林祥梅. 2023

[9]非洲猪瘟病毒M1249L蛋白的表达及单克隆抗体制备. 孙树凯,席飞,郑海学,朱国梁,朱紫祥. 2025

[10]非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定. 冯春莹,张朝霞,刘云飞,黄丽,翁长江. 2024

[11]猪I类白细胞抗原单克隆抗体的制备及其在非洲猪瘟病毒感染机制研究中的初步应用. 王可欣,Wedu Tesfagaber,王婉,尹丽,孔惠,张振江,李芳,高彩霞,步志高,赵东明. 2025

[12]非洲猪瘟病毒pD345L蛋白单克隆抗体的制备及其表位鉴定. 贺筱萍,张元峰,刘学敏,黄丽,翁长江. 2025

[13]非洲猪瘟病毒K205R蛋白单克隆抗体的制备及功能鉴定. 叶银波,赵倩,黄丹妮,杨洋,孙波涛,程颜,刘永杰,秦晓东,郑海学,周斌. 2026

[14]非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备. 王西西,吴映彤,吴竞,陈鸿军,郭晓宇,朱鸿飞. 2020

[15]非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备. 王西西,吴映彤,吴竞,陈鸿军,郭晓宇,朱鸿飞. 2018

[16]非洲猪瘟病毒多表位融合蛋白P72的构建、表达及免疫学特性研究. 郭晶,李重阳,孟庆玲,乔军,伍晔晖,王立霞,马帅,才学鹏. 2019

[17]非洲猪瘟病毒外膜蛋白CD2v的原核表达及其免疫特性的研究. 钟秋萍,于婉琪,薄宗义,吕璐,谢振华,王振忠,郑龙三,张志芳,扈荣良,钱莺娟,陈鸿军. 2020

[18]非洲猪瘟快速检测方法的建立及主要免疫原基因P54的原核表达. 王晓玲,蔺文成,胡峰,王朝,刘朝霞,周顺,毕克东,刘业兵,崔尚金. 2012

[19]非洲猪瘟病毒A137R蛋白的表达动力学与亚细胞定位分析. 孙茂文,周萍萍,王涛,李永锋,潘力,韩玉,孙元,杨玉莹,仇华吉. 2021

[20]非洲猪瘟病毒pE120R蛋白单克隆抗体的制备. 刘传霞,王晓,李雪雯,鲍苗菲,李婷婷,陈欣,翁长江,郑君. 2023

作者其他论文 更多>>