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非洲猪瘟病毒DP71L蛋白原核表达及其多克隆抗体制备

文献类型: 中文期刊

作者: 李志煜;马旭升;马永华;郑海学

作者机构:

关键词: 非洲猪瘟;DP71L蛋白;原核表达;多克隆抗体

期刊名称:中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2024 年

页码:

收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2020版)

摘要: 为深入研究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)DP71L蛋白的生物学功能,根据非洲猪瘟病毒ASFV CN/GS/2018 DP71L基因序列设计特异性引物,通过扩增DP71L基因并克隆到原核表达载体pET28a后转入大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,通过SDS-PAGE、Western-blot进行鉴定,并以纯化出的重组DP71L蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,间接ELISA测定多克隆血清效价,Western-blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果显示,重组DP71L蛋白以可溶和包涵体两种形式表达;间接ELISA测得多克隆抗体血清效价为1∶64 000;Western-blot结果显示,该抗体能特异性识别DP71L蛋白。结论,本研究成功地表达了DP71L重组蛋白,制备了多克隆抗体,为深入研究DP71L蛋白生物学功能奠定了基础。

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