文献类型： 中文期刊
作者： 周婷婷;杨帆;杨洋;齐晓兰;邵文华;黄梦瑶;董星艳;陈治彤;刘泓屹;蔡建涛;曹伟军;蒲秀瑛;张伟;郑海学
作者机构：
关键词： 口蹄疫病毒;JMJD6基因;CRISPR/Cas9;PK-15细胞
期刊名称：中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2025 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）
摘要： 为探究JMJD6(jumonji domain-containing protein 6)基因对口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus， FMDV)复制的影响，通过CRISPR/Cas9基因编辑技术设计并构建JMJD6基因功能缺失细胞系，并在该细胞进行FMDV感染试验，全面分析JMJD6基因在FMDV增殖中的作用。在本研究中，构建2条靶向猪JMJD6基因的单向导RNA(single guide RNA， sgRNA)，在T4连接酶的作用下分别与pX459载体连接，将重组质粒转染PK-15猪肾细胞系；以嘌呤霉素为筛选工具，对JMJD6基因敲除细胞实施筛选，采用有限稀释法获得单克隆细胞株；并对单克隆细胞株进行DNA测序与Western-blotting验证JMJD6基因敲除效果。FMDV感染试验结果表明，该细胞系与PK-WT细胞相比，PK-JMJD6-KO在FMDV的蛋白水平、基因水平和病毒滴度方面有显著抑制作用。综上所述，本研究运用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建JMJD6基因功能缺失的PK-15细胞系，并证实JMJD6基因在FMDV增殖中的重要作用，为后续进一步研究JMJD6基因促进FMDV增殖的调控机制奠定了基础。
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