文献类型： 中文期刊
作者： 王梓晴;葛家振;宋国栋;刘一健;高鹏程;谢莹影;郑福英;储岳峰
作者机构：
关键词： 山羊支原体山羊肺炎亚种;DLD蛋白;间接ELISA
期刊名称：中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2025 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）
摘要： 旨在建立检测山羊支原体山羊肺炎亚种（Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae， Mccp）抗体的间接ELISA方法。以表达纯化的Mccp二氢硫辛酸脱氢酶(dihydrolipoyl dehydrogenase， DLD)蛋白作为包被抗原，通过条件优化，建立间接ELISA抗体检测方法，对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估，并检测临床样本。结果显示，DLD蛋白的包被浓度800 ng/mL；50 g/L脱脂奶粉溶液，37 ℃封闭2 h；血清稀释度1∶20倍，37 ℃孵育60 min；HRP标记的家兔抗山羊IgG稀释为1∶10 000，37 ℃孵育60 min；显色15 min时为最佳反应条件，该方法的临界值为0.352。与绵羊肺炎支原体、山羊支原体山羊亚种、丝状支原体山羊亚种等病原的阳性血清均无交叉反应。敏感性试验可检测出1∶64稀释的Mccp阳性血清，检测灵敏度高于山羊传染性胸膜肺炎间接血凝试剂盒（IHA）。批间和批内重复性试验的变异系数均小于10%，与IHA的符合率达86.67%。本研究建立了Mccp间接ELISA抗体检测方法，为Mccp抗体监测和诊断提供新的技术支持。
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