文献类型： 中文期刊
作者： 刘泓屹;张伟;蔡建涛;古涛鸣;王良锋;陈治彤;曹伟军;郑海学;杨帆;张桂红
作者机构：
关键词： CRISPR/Cas9;TRIM7基因;细胞系;过表达;口蹄疫病毒
期刊名称：中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2025 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）
摘要： 本研究旨在探究TRIM7对口蹄疫病毒（FMDV）复制的影响，首先，针对猪源TRIM7基因外显子设计两条单向导RNA（single guide RNA，sgRNA），分别构建至载体PX459中，将成功构建的sgRNA重组质粒转染PK-15细胞，经嘌呤霉素筛选、有限稀释法亚克隆挑取单克隆细胞，经测序及Western-blot 分析鉴定TRIM7基因的敲除情况，获得敲除TRIM7基因的PK-15细胞系。将TRIM7基因敲除细胞和对照细胞中分别感染FMDV，用Western-blot、RT-qPCR和TCID50测定等方法综合评价敲除TRIM7基因后对FMDV复制的影响。同时，在PK-15细胞上过表达TRIM7检测其对病毒复制的影响。结果显示，成功构建TRIM7基因敲除PK-15细胞系，且FMDV在TRIM7基因敲除细胞系中的复制水平均显著低于对照细胞，当过表达TRIM7时则会显著促进病毒的复制，表明TRIM7影响了FMDV 的复制。本研究为深入探索TRIM7的生物学功能及其调控病毒复制的分子机制奠定基础。
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