非洲猪瘟病毒pH124R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备
文献类型: 中文期刊
作者: 戴观丽;周艳龙;武正前;宋大铭;蔡祎平;周玉龙;李丹;郑海学
作者机构:
关键词: 非洲猪瘟病毒;pH124R蛋白;原核表达;多克隆抗体
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 首先,通过PCR扩增和同源重组技术构建了pET-28a-H124R重组原核表达质粒。经IPTG诱导,pH124R蛋白在大肠杆菌中高效表达,并通过镍柱亲和层析法纯化获得重组蛋白。随后,用pH124R重组蛋白免疫豚鼠,制备了特异性多克隆抗体。通过SDS-PAGE、Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)对其进行检测,结果表明该抗体能够特异性识别ASFV感染细胞中表达的内源pH124R蛋白,且该蛋白主要定位于细胞质病毒工厂区域。本研究成功实现了ASFV pH124R蛋白的原核表达,并制备了可用于Western-blot和IFA试验的特异性多克隆抗体,为深入研究pH124R蛋白的生物学功能提供了重要生物学材料。
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