数字农科院2.0

欧亚类禽H1N1猪流感病毒抗原性变异关键氨基酸的鉴定与分析

文献类型： 中文期刊

作者： 张乃心;许程志;杨玉莹;张亚萍;万云飞;乔传玲;陈化兰

作者机构：

关键词： 猪流感病毒;HA蛋白;抗原性

期刊名称：中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2023 年 14 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： [背景]流感病毒的抗原性主要是由病毒的表面糖蛋白HA决定的,前期利用欧亚类禽型H1N1猪流感病毒(EA H1N1 SIV)HA蛋白单克隆抗体(mAb)筛选抗原逃逸株发现,HA蛋白 190、230和269位(H3编码)氨基酸的改变能够导致病毒发生抗原逃逸,并发现在新近分离的EA H1N1 SIV HA蛋白广泛存在这3个氨基酸的变异.[目的]进一步探索哪些氨基酸对病毒的抗原性具有关键作用,为流感的防控提供科学依据.[方法]选取一株病毒A/swine/Liaoning/SY72/2018(H1N1)SY72 为模式病毒,建立该病毒的反向遗传系统(RGS),又以SY72 为骨架,拯救含有HA基因 190、230 和 269 单点突变重组病毒;利用rSY72病毒制备灭活疫苗,分别免疫SPF鸡和非免疫猪制备其相应的血清,通过中和试验和血凝抑制(HI)试验分析病毒的抗原性,确定影响病毒抗原性的关键氨基酸位点;继而评估HA蛋白不同位点氨基酸的改变对病毒复制特性及受体结合特性等的影响.[结果]分析SY72病毒的HA氨基酸序列发现,该病毒HA蛋白分别含有190D、230M和269R.利用反向遗传技术,分别拯救了病毒rSY72 及单点突变病毒rSY72HA/D190N、rSY72HA/M230I和rSY72HA/R269M;中和试验结果表明,与rSY72相比较,3株突变病毒均能够与两株mAbs发生一定反应;HI试验结果显示,与rSY72 相比较,突变病毒rSY72HA/D190N与 rSY72 免疫鸡血清和猪血清的反应减弱,HI 抗体效价分别出现了 4 倍和 8 倍的差异,而病毒 rSY72HA/M230I 和rSY72HA/R269M与两种血清的反应差异不明显,表明HA蛋白 190 位氨基酸改变对病毒的抗原性影响最为明显;病毒蚀斑测定及复制动力学研究结果发现D190N 的氨基酸替换导致病毒rSY72HA/D190N在MDCK细胞上形成的蚀斑减小,而R269M的氨基酸替换导致病毒rSY72HA/R269M在MDCK细胞上的复制能力下降;3个位点的氨基酸替换均未影响病毒的受体结合特性.[结论]HA蛋白190位氨基酸对EA H1N1 SIV抗原性具有决定作用,269位氨基酸突变使得病毒在MDCK细胞上的复制能力降低.这提示在后续开展的病原学监测中要密切关注这些氨基酸的变异情况,提高对动物流感的预警预报.

分类号：

  • 相关文献

[1]H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白225位氨基酸对病毒致病性的影响. 杨时鳗,许程志,许榜丰,吴运谱,贾云慧,乔传玲,陈化兰. 2022

[2]H3N2亚型猪流感病毒核蛋白基因的优化表达及抗原性分析. 郭利敏,乔传玲,陈艳,杨焕良,张健,辛晓光,陈化兰. 2010

[3]鸭源H7N9亚型流感病毒HA蛋白的真核表达及其免疫保护效力分析. 周陈陈,梁立滨,赵青青,黄山雨,李奇兵,王广文,李俊平,赵玉辉,曾显营,施建忠,李呈军,陈化兰,姜丽. 2019

[4]欧亚类禽型H1N1猪流感病毒HA蛋白的表达及免疫原性评估. 贾云慧,许程志,隋金钰,吴运谱,许榜丰,陈艳,杨焕良,乔传玲,陈化兰. 2019

[5]细胞溶酶体降解A型流感病毒HA蛋白的机制研究. 姚晓雨,王斌,刘宇婷,张晶,刘鑫,郑永辉. 2019

[6]不同致病性H7N9亚型流感病毒HA蛋白的比较分析. 张莹,刘琳,徐海峰,曾显营,施建忠,王秀荣,陈化兰. 2018

[7]表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白重组新城疫病毒的构建以及密码子优化的HA免疫增强作用. 陈曦,于桂梅,刘景利,王金良,姜永萍,葛金英,步志高. 2014

[8]甲型H1N1流感病毒HA蛋白原核表达. 贾园,沈阳,邱亚峰,史子学,邵东华,王晓杜,邓绪芳,王皓婷,高小琪,罗金燕,赵福广,马志永. 2010

[9]甲型H1N1流感病毒HA蛋白结构模建与构象表位分析. 流感研究上海协作组,吴迪,徐天磊,孙静,戴建新. 2009

[10]表达H5亚型禽流感病毒不同形式HA基因重组鸭瘟病毒的构建及HA表达形式的鉴定. 刘璐,丁蕾蕾,柳金雄,陈普成,李爱心,胡玉珍,姜永萍,陈化兰,孙晓林. 2016

[11]甲型H1N1流感病毒HA蛋白的截短表达、纯化及鉴定. 贾园,沈阳,邱亚峰,史子学,邵东华,王晓杜,邓绪芳,王皓婷,赵福广. 2011

[12]质谱筛选与H5、H7亚型流感病毒HA蛋白互作的宿主膜蛋白及其GO分析. 倪子欣,黄海翔,王金良,陈化兰. 2021

[13]肝片吸虫Ftn-1蛋白分子特征、抗原性及其抗体制备. 王熙凤,孟庆玲,乔军,陈英,钟文强,贡莎莎,黄运福,才学鹏. 2018

[14]猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及抗原性研究. 刘萍,王宏博,祁光宇,刘学荣,牟克斌. 2013

[15]坏死梭杆菌44.5ku外膜蛋白的免疫原性分析. 徐晶,陈立志,李淑艳,冯二凯. 2016

[16]旋毛虫TsP53抗原基因的原核表达及抗原性分析. 王鸿盛,李文卉,盖文燕,姚菊霞,曲自刚. 2010

[17]乙型脑炎病毒E蛋白基因的原核表达及ELISA抗体检测方法的建立. 刘昊,尹革芬,鲁会军,张丹,谭磊. 2010

[18]日本血吸虫新基因Sjnanos的克隆、表达及免疫保护效果评估. 王艳,郭凡吉,彭金彪,李晔,洪炀,陈实,傅志强,石耀军,林矫矫. 2010

[19]羊的巴贝斯虫HSP90的分子特性、进化和抗原性分析. 关贵全,刘军龙,刘爱红,李有全,牛庆丽,高金亮,罗建勋,AlainChauvin,殷宏,EmmanuelleMoreau. 2015

[20]辐照对蟹过敏蛋白生化性质和抗原性的影响. 张明琦,高美须,支玉香,潘家荣,李淑荣,吕淑霞. 2009

作者其他论文 更多>>