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敲除ATG5基因Vero-SN细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 刘迪一;陈炳春;杨雪;王会宝;殷相平;任善会;窦永喜

作者机构：

关键词： CRISPR/Cas9;Vero-SN细胞系;ATG5基因;自噬;基因敲除

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为探讨病毒如何利用宿主细胞自噬机制进行复制和传播提供研究模型，本研究利用CRISPR-Cas9系统构建ATG5基因敲除细胞系。首先针对非洲绿猴肾细胞（Vero）的ATG5基因设计靶向sgRNA序列，并将其连接到慢病毒载体中，包装得到重组慢病毒，用其感染Vero-SN细胞，经过筛选得到ATG5基因敲除的亚克隆细胞系。利用TCID50和Western-blot技术检测小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus， PPRV）分别在Vero-SN细胞和ATG5基因敲除细胞系中的复制能力。结果表明，本研究成功建立了VeroSN-ATG5KO细胞系，且抑制细胞自噬不利于病毒复制。该基因敲除细胞系的建立为后续探究病毒与自噬蛋白的相互作用及分子机制提供了试验材料。

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