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区分禽流感病毒亚型诊断基因芯片的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 杨忠苹;王秀荣;石霖;田丽娜;王煜;陶启蒙;陈化兰

作者机构：

关键词： 禽流感;基因芯片;亚型鉴别

期刊名称：中国动物检疫

ISSN： 1005-944X

年卷期： 2008 年 25 卷 10 期

页码： 29-32

摘要： 制备了可同时区分AIVH5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片。试验以重组质粒为模板,进行PCR扩增,然后用异丙醇沉淀法进行纯化,制备探针及内参基因。将探针及内参基因用点样缓冲液稀释到0.3μg/μL后用芯片点样仪将其点制到醛基化基片上,样点中心间距450μm,样点直径220μm。将点好的基片在室温干燥24h以上,后经65℃再水合10s、80℃干燥、65mj紫外线交联照射25min后,再用封闭液封闭,95℃变性处理,成功构建了能区分禽流感血凝素H5,H7,H9亚型及神经氨酸酶N1,N2亚型的检测基因芯片。在PCR扩增中标记待检样品,对制备的检测芯片进行质量检验,结果表明,制备的区分禽流感病毒亚型基因芯片可区分AIV部分亚型。

分类号： S852.659.5

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