小鼠肺组织线粒体-脂滴拴系分离和纯化方法的探究
文献类型: 中文期刊
作者: 杨国栋;曲光刚;朱启运;杨鹏飞;杜晓华
作者机构:
关键词: 线粒体;脂滴;肺组织;线粒体-脂滴拴系;分离方法
期刊名称:甘肃农业大学学报
ISSN: 1003-4315
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 【目的】本研究旨在探究小鼠肺组织线粒体-脂滴拴系分离和纯化的方法,鉴定拴系形成及其在脂代谢中发挥的功能。【方法】试验选取6至8周龄的雄性C57(C57BL/6)小鼠,采集其肺组织,进行匀浆处理后利用差速离心法,结合离心转速、时间和饲养温度等参数的优化,确定高效获取线粒体-脂滴拴系的最佳条件。研究利用免疫荧光对线粒体-脂滴拴系形成进行鉴定,通过ELISA方法对获得的线粒体-脂滴拴系进行游离脂肪酸含量(Free Fatty Acids,FFAs)、脂肪酸氧化水平(Fatty Acid Oxidation,FAO)和ATP含量的测定。【结果】在饲养温度为25℃,以8000×g离心10分钟(4℃)的条件下,能够获得最多且纯度最优的线粒体-脂滴拴系,同时脂滴的大小与其形成线粒体-脂滴拴系的能力呈正相关。此外,线粒体-脂滴拴系的形成显著促进了FFAs的释放、FAO的增强以及ATP的生成。【结论】本研究成功建立了小鼠肺组织线粒体-脂滴拴系的分离和纯化方法,并证明拴系的形成对脂代谢具有调控作用。
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