文献类型： 中文期刊
作者： 卢炳州;李建斌;王姿逸;杨洋;赵陇和;李亚军;刘华南;李明桂;马坤;郑海学;郭建宏;茹毅;郝荣增
作者机构：
关键词： 脯氨酰寡肽酶;CRISPR/Cas9;基因敲除;口蹄疫病毒;病毒增殖
期刊名称：中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2025 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）
摘要： 为探索脯氨酰寡肽酶（prolyl oligopeptidase， POP）基因敲除的猪肾上皮细胞系（PK15），对口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus， FMDV）增殖的影响，采用CRISPR/Cas9基因编辑技术，通过慢病毒包装、嘌呤霉素筛选及有限稀释法单克隆化，构建POP基因敲除的PK15细胞系（POP-KO），并以野生型WT-PK15细胞为对照，接种FMDV，通过实时荧光定量RT-PCR检测FMDVRNA水平，通过Western-blot分析病毒结构蛋白VP1表达量，及病毒滴度测定(TCID50)方法综合评估POP缺失对FMDV增殖的影响。结果表明，与WT-PK15细胞相比，POP-KO细胞中VP1蛋白表达水平显著降低（P < 0.001），病毒滴度降低了1.24 lg TCID50/mL（P < 0.001），FMDV RNA拷贝数显著低于对照细胞（P < 0.001）。本研究成功建立了POP基因敲除的PK15细胞系，证实POP缺失可显著抑制FMDV的增殖过程，揭示POP是FMDV复制的关键宿主促进因子。
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