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猪CD82蛋白的表达纯化和单克隆流式抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 常志海;毛箬青;栗亮亮;郭金杰;陈桂珍;代宏宇;董海聚;朱紫祥;刘芳;郑海学

作者机构：

关键词： CD82蛋白;单克隆抗体;原核表达;流式细胞术

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为研究CD82蛋白在猪病中的功能，提供一种针对猪CD82蛋白的单克隆流式抗体，本研究通过原核表达系统制备猪CD82蛋白大细胞外环结构域(EC2)重组抗原，经Ni-NTA亲和层析柱纯化后免疫BALB/c小鼠。通过4次免疫和ELISA筛选，获得抗体效价最高的小鼠，用其脾细胞进行细胞融合。对融合细胞上清用流式细胞术进行筛选，选取效果最好的1株杂交瘤细胞株11G3制备腹水并纯化，其抗体亚型为IgG2a型。通过间接ELISA和流式细胞术对纯化后的CD82 mAb进行验证，显示出高亲和力和特异性，能有效标记表达CD82蛋白的猪肺巨噬细胞（PAM）。本研究结果为CD82蛋白在猪病中的功能研究提供了重要的生物学工具，为进一步探索其在免疫调节和抗病毒反应中的作用奠定了基础。

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