文献类型： 中文期刊
作者： 卢炳州;茹毅;郝荣增;李亚军;杨洋;杨锐;毛玉涵;蒋成辉;陶世宇;郑海学;余四九;崔燕
作者机构：
关键词： 铁蛋白纳米颗粒;口蹄疫病毒(FMDV);中和表位;T细胞表位;免疫原性
期刊名称：农业生物技术学报
ISSN： 1674-7968
年卷期： 2024 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）
摘要： 蛋白纳米颗粒能够在表面展现多拷贝抗原，模拟病毒的结构形态，更有利于免疫细胞摄取和促进抗原递呈，从而增强疫苗保护效力。本研究旨在利用大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统制备展示口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)优势中和表位的铁蛋白纳米颗粒，并评估其免疫原性。首先以幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)铁蛋白序列为基础，将FMDV优势中和表位序列插入铁蛋白第33和34位氨基酸之间，同时将耶尔森氏菌属(Yersinia) T细胞表位序列插入铁蛋白氨基酸序列的氨基末端，构建具有铁蛋白序列、B细胞表位(优势中和表位)和T细胞表位的重组表达质粒pET28a-FBT，以仅插入铁蛋白序列的重组质粒pET28a-Fer作为对照。将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞，经诱导表达和分子筛层析纯化获得目的蛋白，利用SDS-PAGE、Western blot、粒径分析和透射电镜进行鉴定，进一步免疫BALB/c小鼠(Mus musculus)评价免疫原性。结果显示，利用大肠杆菌表达系统成功制备的铁蛋白纳米颗粒FBT可与FMDV阳性血清发生特异性反应；FBT免疫14 d即产生血清抗体，并持续升高，在免疫35 d中和抗体效价最高可达1:128；同时，FBT免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖水平和白介素2 (interleukin 2, IL-2)、IL-4、IL-10、干扰素-γ (interferon-γ, IFN-γ)分泌水平显著高于对照组(P<0.05)。本研究制备了展示FMDV中和表位且具有良好免疫原性的铁蛋白纳米颗粒，为新型口蹄疫基因工程疫苗的研制提供技术支持。
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