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非洲猪瘟病毒p15蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫原性评价

文献类型： 中文期刊

作者： 党海迷;杨洋;茹毅;郝荣增;蒋成辉;赵陇和;卢炳州;李亚军;胡馨予;韩盛楠;伍国强;郑海学

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;p15蛋白;昆虫杆状病毒表达系统;免疫原性评价

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 6 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 本研究旨在利用昆虫杆状病毒表达系统制备非洲猪瘟病毒(ASFV)p15蛋白,并对其免疫原性进行评价,为非洲猪瘟亚单位疫苗研究提供试验基础.首先把编码p15蛋白的基因克隆至载体pFastBac1中,构建重组质粒pFastBac-p15,将该质粒与DH10Bac同源重组后转染昆虫细胞收获重组杆状病毒rBac-p15,将rBac-p15感染sf9细胞进行重组蛋白的表达;然后利用亲和层析纯化获得目的蛋白,并利用SDS-PAGE、Western-blot和IFA鉴定重组蛋白的表达及反应性;再将p15蛋白免疫小鼠,评估其体液和细胞免疫应答水平.结果表明,在感染重组杆状病毒rBac-p15的sf9细胞中,p15蛋白获得高效表达,并可被ASFV康复猪血清特异性识别.p15蛋白免疫小鼠诱导产生高水平的特异性抗体和细胞因子,有利于刺激脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞的增殖.综上,本研究利用昆虫杆状病毒表达系统成功制备了 p15蛋白,该蛋白能够同时诱导很好的体液和细胞免疫应答,有助于非洲猪瘟疫苗的进一步研究.

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