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禽流感、新城疫可目视化诊断蛋白芯片的制备及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 石霖;王秀荣;杨忠苹;陶启蒙;王煜;武嘉男;蔡冬冬;包红梅;陈化兰

作者机构：

关键词： 禽流感;新城疫;可视化;诊断;蛋白芯片

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2009 年 31 卷 01 期

页码： 60-64

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究制备了可以同时鉴别诊断禽流感(AI)、新城疫(ND)2种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。以超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了2种病毒蛋白抗原,用点样缓冲液稀释后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;将芯片与待检血清杂交后,再与胶体金标记的二抗杂交,银染显色后根据灰度值判定结果,从而建立了2种禽病的可视化蛋白芯片鉴别诊断方法。采用该方法对18份现地血清样品进行初步检测,结果显示该芯片可特异性的与相应的抗体杂交,无交叉反应,而且呈现较强的杂交信号,其信号灰度值在阳性血清浓度为50μg/mL～300μg/mL范围内成线性关系(Y=0.426X+4.225)。用该芯片方法和琼扩(AGP)抗体检测方法对18份现地样品进行符合率检测,结果表明该可视化蛋白芯片具有很好的特异性,并且检测灵敏度为是AGP方法的400倍以上。研究表明该方法可用于同步鉴别2种禽病,是一种有效的抗体检测新方法。

分类号： S854.43

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