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牛朊蛋白单氨基酸变异体的原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 陈建华;吴润;刘湘涛;陈豪泰

作者机构：

关键词： 牛朊蛋白;单氨基酸变异体;原核细胞表达;表达条件优化

期刊名称：中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2005 年 35 卷 04 期

页码： 245-250

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 应用pGEX原核表达载体构建了牛朊蛋白的1个正常重组蛋白和3个单氨基酸变异体的原核表达质粒,即pGEX BoPrP(93~241)、pGEX BoPrP(93~241)(S154N)、pGEX BoPrP(93~241)(A129V)和pGEX BoPrP(93~241)(Q234R)。经转化E.coli BL21 (DE3),均表达了预期大小约为42.4 ku的融合蛋白。在优化的诱导表达条件下,各重组菌可产生表达量占细菌总蛋白量30%~45%的融合蛋白。经免疫印迹检查,所有融合蛋白均可与抗牛单克隆抗体4C11 反应。表明,单氨基酸突变并不影响单抗4C11的识别表位。

分类号： S852.659.7

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