重组猪干扰素β在CHO细胞中的表达及其抗口蹄疫病毒活性的研究
文献类型: 中文期刊
作者: 王凌云;郝荣增;茹毅;常辉;杨洋;李亚军;张丽伟;卢炳州;刘艳红;龚真莉;井波;齐萌;郑海学
作者机构:
关键词: 猪IFN-β;CHO细胞;蛋白表达;抗病毒活性;口蹄疫病毒
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2023 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 本研究旨在利用CHO细胞表达系统制备重组猪干扰素β(rPoIFN-β),检测其体外抗口蹄疫病毒(FMDV)活性。构建猪IFN-β重组真核表达质粒pcDNA3.1-PoIFN-β,转染悬浮培养的CHO细胞,进行上清分泌表达;通过CHO细胞表达系统,成功分泌表达和制备纯化的rPoIFN-β。通过CCK-8实验分析rPoIFN-β对细胞的毒性,结果显示纯化的rPoIFN-β对细胞无明显毒性;采用VSV/PK-15系统检测rPoIFN-β抗病毒活性效价,结果显示其抗病毒活性效价为4.54×107 U/mg;制备的rPoIFN-β可显著抑制O型和A型FMDV在PK-15细胞的复制,表现出较强的抗病毒活性;通过分析rPoIFN-β对细胞ISGs的诱导作用,发现rPoIFN-β能够显著刺激12种ISGs的表达。研究结果表明,本试验制备纯化的rPoIFN-β具有较低的细胞毒性和较高的抗病毒活性效价,为口蹄疫防控制剂的开发和研究提供了基础数据。
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