过表达HDAC6基因的Vero细胞系建立及其对狂犬病病毒增殖效率评价
文献类型: 中文期刊
作者: 殷娟斌;张志雄;王莎莎;马小琴;梁正基;孙跃峰;王相伟;殷相平
作者机构:
关键词: 狂犬病病毒;HDAC6;Vero细胞;慢病毒包装;过表达细胞系
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2022 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; CSCD(2021-2022年度) ; ; 科技核心(2021版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 为提高狂犬病病毒 (rabies virus,RABV)在细胞中的增殖效率,本研究利用慢病毒包装系统构建组蛋白去乙酰化酶6 (histone deacetylase 6,HDAC6)过表达的Vero/HDAC6细胞系,分析RABV在Vero/HDAC6细胞系与Vero细胞中的复制差异。首先以非洲绿猴HDAC6基因为目标构建重组质粒plv-SV40-puro-3×flag-HDAC6,并与辅助质粒pMD2.G和psPAX2共转染至HEK-293T细胞进行慢病毒包装。将包装好的慢病毒感染Vero细胞并通过嘌呤霉素筛选获得过表达HDAC6基因的阳性细胞。利用TCID50和Western-blot技术检测RABV在Vero/HDAC6细胞系中的复制能力。结果表明,过表达HDAC6能够明显促进RABV复制,并且RABV在Vero/HDAC6细胞系中的增殖能力高于野生型细胞。本研究构建的Vero/HDAC6细胞系能显著促进RABV的增殖,为RABV疫苗候选细胞株奠定了基础。
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