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非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA抗体检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 周改静;罗俊聪;石正旺;万颖;杨波;曹丽艳;宋锐;田宏;郑海学

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;p30蛋白;单克隆抗体;阻断ELISA

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 为建立检测非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体的阻断ELISA方法，本研究利用原核表达的ASFV p30重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体。以重组p30蛋白作为包被抗原，以辣根过氧化物酶（HRP）标记的p30单克隆抗体作为检测抗体，经条件优化，建立了一种检测ASFV抗体的阻断ELISA方法。ROC曲线分析显示，该方法最佳阻断率临界值为16.63%。该方法与CSFV、FMDV-O/A、PRRSV、PEDV、SVA的阳性血清均无交叉反应；最低能检出1∶128稀释的阳性血清；批内和批间变异系数（CV）均＜10%。用本方法与商品化试剂盒平行检测208份血清样品，Kappa值为0.96，表明具有高度一致性。上述结果表明，本研究建立的阻断ELISA方法具有较高的特异性和敏感性，可用于ASFV抗体的检测，为ASFV流行病学调查及猪群疫情监控提供技术支持。

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