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茶氨酸生物合成工程菌构建

文献类型： 中文期刊

作者： 王贤波;王丽鸳;成浩;周健;林智

作者机构：

关键词： γ-谷氨酰转肽酶;茶氨酸;工程菌;构建

期刊名称：茶叶科学

ISSN： 1000-369X

年卷期： 2007 年 27 卷 01 期

页码： 65-70

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过PCR扩增E.coliDH5α的γ-ggt基因,产物经纯化后用KpnI和XhoI双酶切,回收γ-谷氨酰转肽酶基因目的片断,并与经相同双酶切的表达载体pET-32a连接,得到重组质粒pET-GGT。将重组质粒转化到E.coliBL21中,获得工程菌。工程菌株经0.05mol/LIPTG,32℃诱导表达,湿菌体的酶活达到2.0U/g,大约是出发菌株E.coliDH5α的15倍。工程菌催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的产量达到29.40g/L,L-Gln的转化率为48.22%,其催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的能力比出发菌株E.coliDH5α提高了100多倍。

分类号： S571.1

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