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抗非洲猪瘟病毒单链抗体的构建、表达及活性鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 王丽娟;石正旺;杨波;麻园;罗俊聪;万颖;宋锐;田宏;郑海学

作者机构:

关键词: 非洲猪瘟病毒 ; SOE-PCR ; 单链抗体 ; 诊断与防控

期刊名称:畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2021 年 52 卷 05 期

页码:

收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)

摘要: 制备抗非洲猪瘟病毒(ASFV)猪源单链抗体(ScFv),并对其生物学活性进行鉴定,筛选出具有ASFV反应活性的猪源单链抗体(ScFv),为ASFV的诊断提供新的材料。采集ASFV感染康复猪的外周血,分离淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,以此为模板通过PCR扩增得到猪源IgG重链可变区与轻链可变区基因,利用SOE-PCR技术扩增拼接得到猪源ScFv基因;构建pET-30a-ScFv表达载体,进行蛋白的表达与纯化,用ELISA和IFA鉴定ScFv抗体的反应活性。结果显示,成功扩增出猪源ScFv(VH-VLκ、VH-VLλ)基因,鉴定到1株与ASFV存在反应活性的ScFv(VH-VLλ11)抗体。结果表明,成功筛选到1株与ASFV存在反应活性的ScFv(VH-VLλ11)抗体,为ASFV诊断和防控提供了新型原材料。

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  • 相关文献

[1]非洲猪瘟病毒A137R蛋白多克隆抗体的制备与应用. 向志达,张涛清,张元峰,黄丽,杨玉莹,翁长江. 2021

[2]非洲猪瘟病毒感染猪胃肝淋巴结病理组织学变化特征. 陈畅,何希君,汪昊,伍靖贤,吴睿智,丁佰韬,步志高,陈秋生. 2021

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