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口蹄疫病毒Asia1/JSWX株基因组全长感染性克隆的体外拯救与序列分析

文献类型: 中文期刊

作者: 仝燕许;陈豪泰;潘丽;张永光;王永录

作者机构:

关键词: 口蹄疫病毒Asia1型;感染性全长cDNA;RNA体外转录本;序列分析;病毒拯救

期刊名称:中国兽医科学

ISSN:

年卷期: 2014 年 08 期

页码: 771-780

收录情况: CSCD

摘要: 通过反转录聚合酶链反应,获得了口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JSWX株基因组3′端长片段(长约7.5kb)和5′UTR中ploy(C)前后的2个短片段。5′UTR的2个短片段经融合PCR扩增得到长约710bp的片段。用引物在基因组5′末端引入AflⅡ酶切位点和T7启动子,在5′UTR内引入SpeⅠ酶切鉴定位点,在3′末端引入NotⅠ酶切位点,将融合片段和3′端长片段顺次连接到载体pSL1180。经T7体外转录系统获取的RNA转录本与脂质体共转染BHK21细胞。测序结果表明,构建的病毒基因组全长cDNA为8197nt,分别包括1个长为1095nt的5′UTR[含有1个17nt的ploy(...

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