羊痘病毒抗体胶体金免疫层析试纸条的研制与初步应用
文献类型: 中文期刊
作者: 何印娣;石正旺;石鑫泰;陈婕;廖焕程;张帆;罗俊聪;朱昱茜;席韬;李帅鹏;王川;田宏;郑海学
作者机构:
关键词: 羊痘病毒;122蛋白;多克隆抗体;胶体金试纸条
期刊名称:畜牧兽医学报
ISSN: 0366-6964
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 旨在建立一种快速、简便、特异、灵敏的羊痘病毒抗体的通用型胶体金检测方法。通过原核表达、纯化获得羊痘病毒122重组蛋白,并制备122蛋白多克隆抗体。将122蛋白与胶体金偶联,作为金标抗原,再将122蛋白及兔多克隆抗体包被在硝酸纤维素膜(NC)上,分别作为检测线(T线)和质控线(C线),经条件优化,研制成检测羊痘病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,成功获得122重组蛋白,大小约为32 ku,胶体金试纸条可在12 min特异性检测到羊痘病毒抗体;与其他常见家畜疫病病原阳性血清无交叉反应;检测SPPV、LSDV和GTPV阳性血清的灵敏度分别为1:64、1:128和1:128,与市售羊痘抗体间接ELISA诊断试剂盒(效价1:128、1:256和1:256)的敏感性相当;对130份临床血清样品的检测与商品化试剂盒检测结果进行比较,两者的kappa值为0.93,为高度一致。本研究成功研制了羊痘病毒抗体通用型胶体金免疫层析试纸条,具有较高的敏感性和特异性,且具有成本低、检测快速、操作简便、结果容易判断等特点,对羊痘现场检测具有实际应用价值。
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